液相色譜填料的分離機(jī)理是基于混合物中各組分對兩相親和力的差別。根據(jù)液相色譜填料的不同,液相色譜分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。
液相色譜填料可考慮用于制備HPLC中,但制備色譜由于填料使用量大,故對填料尤其是用于大規(guī)模工業(yè)化色譜中的填料有其特殊的要求。
液相色譜填料高的機(jī)械強(qiáng)度
液相色譜填料在填充及用于目標(biāo)產(chǎn)物的分離純化中,始終承受很大的機(jī)械壓力,而且在工業(yè)生產(chǎn)特別是制藥業(yè)中,一根DAC色譜柱裝置常用于分離與純化多種藥物,然而一種填料往往于一種產(chǎn)品。因此,對不同藥物采用不同的純化流程時(shí),柱中原有的填料必須壓出,填充其他合適的填料,而壓出后的填料仍需保留備用。所以對填料的機(jī)械強(qiáng)度要求通常比分析用的填料更高,以便反復(fù)使用。機(jī)械性能差的填料經(jīng)受不住反復(fù)填充,它們易破碎,產(chǎn)生細(xì)顆粒,降低柱滲透性,甚至堵塞濾片,造成流速分布不均勻,影響分離產(chǎn)物的純度,zui終在系統(tǒng)中產(chǎn)生*的柱壓,無法繼續(xù)使用。因此填料的機(jī)械強(qiáng)度是一項(xiàng)極重要的質(zhì)量指標(biāo),關(guān)系到填料的壽命和生產(chǎn)的*運(yùn)行。
液相色譜填料高負(fù)載量
在制備和工業(yè)流程規(guī)模的色譜中,液相色譜填料的負(fù)載量是另一項(xiàng)極重要的因素,負(fù)載量越大,則單位重量填料可處理的原料量就可增加,因而提高了產(chǎn)率。負(fù)載量與比表面積、孔徑大小、孔徑大小的分布及表面官能團(tuán)的密度等參數(shù)有關(guān)。在填料的設(shè)計(jì)與制備過程中將這些參數(shù)優(yōu)化后,就可使單位重量固定相中的有效表面積zui大。隨著孔徑增大,單位重量填料的比表面(SSA)減小,故單位重量填料的樣品吸附量AC(mg/g)也隨之減小,但孔徑100?的卻比70?的AC(mg/g)要大,這說明孔徑70?的填料中,有相當(dāng)一部分小孔溶菌酶分子無法進(jìn)入,因而它們的比表面是無效的;而在100?的填料中,溶菌酶分子能擴(kuò)散進(jìn)入的小孔要比70?的填料中多得多,故有效比表面比70?的大,所以AC(mg/g)也隨之增大,這也說明了為什么單位面積的吸附量AC(mg/m2)隨孔徑增大而增大。因?yàn)榇罂滋盍现械谋砻娣e多數(shù)為目標(biāo)產(chǎn)物的有效表面積,所以應(yīng)該說影響負(fù)載量的不是填料的比表面,而是填料對目標(biāo)產(chǎn)物分子的有效表面積。因此對不同的目標(biāo)產(chǎn)物,隨著其分子大小及物化性質(zhì)的不同,選擇合適孔徑及孔徑分布的填料是獲得高負(fù)載量的一個(gè)關(guān)鍵因素。